詳細介紹
組織來源:軟骨組織
種屬來源:大鼠
細胞簡介:大鼠軟骨細胞分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細胞,、基質及纖維構成。軟骨組織再生能力強,,這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞,,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎⑿纬绍浌腔|,,細胞被埋在軟骨陷窩內而變?yōu)殪o止的軟骨細胞,。根據軟骨組織內所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨,、彈性軟骨和纖維軟骨三種,,其中以透明軟骨的分布較廣,結構也較典型,。軟骨細胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內,。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布,,體積較小,,呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,,越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形,,細胞核圓形或卵圓形,,染色淺,細胞質弱嗜堿性,,常見數量不一的脂滴,。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內,這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,,稱為同源細胞群,。電鏡下,軟骨細胞有突起和皺褶,,細胞質內有大量的粗面內質網和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體,。在組織切片中,軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
傳代比例:1:2
一,、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
大鼠軟骨細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1648 |
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
大鼠軟骨細胞是一種貼壁細胞,,細胞形態(tài)呈梭形,、多角形,,在技術部標準操作流程下,,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。
客戶收到細胞后,,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,,1000rpm,,離心5min,保留沉淀,;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),;消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3)經1000rpm,離心5min,,丟棄上清,,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內,;
4)待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,,避免細胞因沒貼好影響實驗,;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),,依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
公司正在出售的產品:
小鼠前列腺上皮細胞 | MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X細胞+GFP |
His Tag標簽抗體 | 磷化鳥苷轉換因子VAV1抗體 |
LS174T人結直腸腺癌細胞 | 膽鹽磺基轉移 |
LS180人結直腸癌細胞 | 羥基類固醇脫氫3α/3α-羥類固醇脫氫Ⅰ抗體 |
LS513人結直腸癌細胞 | 中性膽酯水解1抗體 |
LX-2人肝星形細胞 | 磷化酪氨磷α抗體 |
LX-2+GFP人肝星形細胞+GFP | 白介3抗體 |
Mahlavu 人肝癌細胞 | 磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體 |
MCF-10A人乳腺上皮細胞 | 2型豬鏈球菌溶血抗體 |
MCF-7人乳腺癌細胞 | 磷化G氨基丁B型受體2抗體 |
MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉耐藥細胞 | 磷化整合β3/CD61抗體 |
MCF-7+luc人乳腺癌細胞熒光標記 | 大鼠軟骨細胞短鏈脫氫還原3抗體 |
MDA-KB2人乳腺細胞 | 磷化細胞凋亡信號調節(jié)激1抗體 |
MDA-MB-157人乳腺癌細胞 | 磷化絲裂原活化的蛋白激p38β抗體 |
MHCC-97H人高轉移性肝癌細胞 | 酪氨蛋白激B3抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),,便于和技術部溝通,;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯系,,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。