大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人肺癌細(xì)胞,A549細(xì)胞人肺癌細(xì)胞,，Calu-1細(xì)胞人肺癌細(xì)胞，NCI-H2126細(xì)胞人肺癌細(xì)胞,，NCI-H3255細(xì)胞人肺癌細(xì)胞，PC-9細(xì)胞人肺成纖維細(xì)胞,HFL-1細(xì)胞人肺鱗癌細(xì)胞，NCI-H226細(xì)胞組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒組蛋白H2A(H2A)ELISA試劑盒組蛋白H1(H1)ELISA試劑盒組胺-N-甲基轉(zhuǎn)移(HNMT)ELISA試劑

組織來(lái)源：腎組織

種屬來(lái)源：大鼠

細(xì)胞簡(jiǎn)介：大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織,；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,，以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎小球是腎元中的用于將血液過(guò)濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球,。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈,，而是流入出球小動(dòng)脈,。在腎小球內(nèi),，微血管受到高壓，而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi),。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,，腎小球的過(guò)濾速率便稱為腎小球過(guò)濾率。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一類特殊微血管類型的細(xì)胞,。細(xì)胞為圓形,、多角形，單層貼壁生長(zhǎng),；細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核為圓形或卵圓形,。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球毛細(xì)血管壁腔側(cè),，與血流直接接觸，是腎小球?yàn)V過(guò)膜的第一道屏障,，可粘附細(xì)菌和白細(xì)胞,，修復(fù)基底膜，并有抗凝,、抗血栓的作用,；所以，體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在免疫學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究?jī)r(jià)值,。

培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：PLL(0.1mg/ml),，明膠(0.1%)

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

傳代比例：1:2
一、細(xì)胞基本屬性

二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈內(nèi)皮細(xì)胞樣,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決。