大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞的相關產(chǎn)品：小鼠胰腺星狀細胞大鼠視網(wǎng)膜Muller細胞大鼠視網(wǎng)膜色上皮細胞大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞大鼠輸尿管上皮細胞大鼠胎盤間充質干細胞大鼠外周血白細胞大鼠外周血單個核細胞大鼠外周血中性粒細胞大鼠微血管周細胞大鼠胃黏膜上皮細胞大鼠胃平滑肌細胞大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞大鼠下丘腦神經(jīng)元細胞

大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

包被條件：PLL(0.1mg/ml),，明膠(0.1%)

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

傳代比例：1:2

細胞簡介：大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質,，如葡萄糖、蛋白質,、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等，以調節(jié)水,、電解質平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素,、促紅細胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等,，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行,。腎動脈的分支為葉間動脈,，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質與髓質交界處,，形成與腎表面平行的弓狀動脈,。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng),，再匯集成出球小動脈，出腎小體,。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng),，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈,、葉間靜脈,，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,，又是腎的機能血管,，與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng),，血壓較高,，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網(wǎng),，血壓較低,，利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結構細胞之一,，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用,，③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
一,、細胞基本屬性

原代細胞分離培養(yǎng)的思路：

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。

實驗步驟：

一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。

二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。

三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。

四,、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質,。

五、大腦皮質放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。

七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min,，4℃離心，去上清,。

八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液。

九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min,，4℃),，1000×g，4℃離心10min,。

十,、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。

加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。

公司正在出售的產(chǎn)品：

注意事項：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。