大鼠視網膜微血管內皮細胞公司正在出售的產品：人卵巢癌細胞,，OV-90細胞人卵巢癌細胞,，SK-OV-3細胞人卵巢透明細胞癌細胞,，ES-2細胞人卵巢腺癌細胞,，OVCAR-3細胞人慢性骨髓性白血病細胞系,，K562細胞人慢性粒細胞白血病細胞，KCL-22細胞人膜間皮細胞,，MET-5A細胞中心粒旁(PCNT)ELISA試劑盒中腦星形膠質細胞來源神經營養(yǎng)因子(MANF)ELISA試劑盒中腦核仁蛋白(MIDN)

組織來源：視網膜組織

種屬來源：大鼠

細胞簡介：大鼠視網膜微血管內皮細胞分離自視網膜組織,；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜,。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網膜脫離,。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞,、遮光,、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,，由外向內分別為：色素上皮層,、視錐、視桿細胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層,、內顆粒層、內叢狀層,、神經節(jié)細胞層,、神經纖維層、內界膜,。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭,。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成,。第一神經元是視細胞層，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多,。第二層叫雙節(jié)細胞,，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層,，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口,。視網膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū)，其分辨能力,。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力,、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,，在視網膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性，在腦和視網膜中,，這些內皮細胞具有內屏障的功能,，在調節(jié)血管生理狀態(tài)，釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義,。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

傳代比例：1:2
一,、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

大鼠視網膜微血管內皮細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈內皮細胞樣,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

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四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。