產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | A01X1554 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 食管組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價(jià) | ¥3750 |
5×105 | 3750元 | 15 瓶 可售 |
更新時(shí)間:2024-03-21 16:56:12瀏覽次數(shù):507
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
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貨號(hào) | A01X1554 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 食管組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
組織來源:食管組織
種屬來源:大鼠
細(xì)胞簡介:大鼠食管上皮細(xì)胞分離自食管組織,;食管是咽和胃之間的消化管,,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,,而逐漸增長,。食管可分為頸段、胸段和腹段,。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),,胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,,食管的上皮細(xì)胞增殖,,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,,甚至一度閉鎖,,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層,、黏膜下層,、肌層和外膜。其中,,黏膜層,,包括上皮、固有層和黏膜肌層,。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,,耐摩擦,有保護(hù)作用,。在食管與胃賁門交界處,,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的,、無角化,、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋,其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,,防止食管內(nèi)容物的滲入,。特別的是,,層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下。從組織學(xué)上講,,食管上皮由兩層組成,,基底層和分化層;其中,,僅基底層的細(xì)胞可以增殖,然后向食管腔移行,。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá),。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型。
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
大鼠食管上皮細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1554 |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
大鼠食管上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,,細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣,,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代,;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3)用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4)待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,,1000rpm,離心5min,,保留沉淀,;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),;消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,,離心5min,,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),;
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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KLF4重組兔單克隆抗體 | 腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白1/TNFα-IP 8L1抗體 |
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Y79人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 卵母細(xì)胞透明帶糖蛋白3抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,消化時(shí)間不宜過長,,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。