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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1259 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 肺組織 | 種屬來源 | 人 |
詳細介紹
組織來源：肺組織
種屬來源：人
細胞簡介：人肺成纖維細胞分離自肺組織,；肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于 心之上,。肺有分葉，左二右三,，共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉,、鼻相連,，故 稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分 ,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或 星形的扁平狀結(jié)構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛 ,，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維 細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重 要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基：中。30min細胞貼 壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁全，伸展成梭形,，胞 核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細 胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細胞質(zhì)透明，細胞核較大,，呈橢圓形 ,，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成 纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持肺器官的正常形態(tài),，合成和釋放細胞 外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織,。
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
傳代比例：1:2
一,、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人肺成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1259 |
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人肺成纖維細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠氣管平滑肌細胞 | 大鼠腸微血管內(nèi)皮細胞 |
蛋白質(zhì)磷2A （alpha + beta）抗體 | 綠色熒光蛋白單克隆抗體 |
大鼠小腸平滑肌細胞 | 血管緊張轉(zhuǎn)換2單克隆抗體 |
兔羊膜間質(zhì)細胞 | 冠狀病毒2 Spike蛋白中和抗體 |
人肝動脈內(nèi)皮細胞 | 錯配修復蛋白2重組兔單克隆抗體 |
小鼠結(jié)腸平滑肌細胞 | 廣譜細胞角蛋白PCK單克隆抗體 |
大鼠結(jié)腸平滑肌細胞 | 精氨1重組兔單克隆抗體 |
兔角膜上皮細胞 | 突觸小泡蛋白P38重組兔單克隆抗體 |
人肝動脈平滑肌細胞 | 白血病相關蛋白18/癌蛋白18重組兔單克隆抗體 |
小鼠小腸黏膜上皮細胞 | HA tag標簽單克隆抗體 |
大鼠小腸黏膜上皮細胞 | 細胞信號轉(zhuǎn)導分子SMAD3重組兔單克隆抗體 |
兔肺大靜脈內(nèi)皮細胞 | 人肺成纖維細胞賴氨特異性脫甲基4B重組兔單克隆抗體 |
人肝星狀細胞 | 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子重組兔單克隆抗體 |
兔腸動脈內(nèi)皮細胞 | 白蛋白（內(nèi)參）單克隆抗體 |
人肝竇內(nèi)皮細胞 | 冠狀病毒2 Spike蛋白中和抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
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