化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人肝內(nèi)膽管上皮細胞
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞簡介：人肝內(nèi)膽管上皮細胞分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋,，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接,。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收,，在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,，肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用,。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%，其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能,，參與肝臟的代謝,、排泌、免疫等生理過程,，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用,。研究表明，常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎,、膽管癌等疾病,，都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷,。因此,，了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義,。
一,、細胞基本屬性
細胞名稱 | 人肝內(nèi)膽管上皮細胞 | 商品貨號 | A01X1297 |
組織來源 | 肝臟組織 | 種屬來源 | 人 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞,，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定。
實驗步驟：
一,、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二,、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,，去除小腦和間腦,。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì)。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g，20min,，4℃離心,，去上清。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min,，去上清液,。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min，4℃),，1000×g,，4℃離心10min。
十,、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min,，室溫),，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人肺微血管平滑肌 | 大鼠前脂肪細胞 |
TWIST蛋白抗體 | 磷化酪氨蛋白激BTK重組兔單克隆抗體 |
人大隱靜脈平滑肌細胞 | 磷化微管相關蛋白單克隆抗體 |
小鼠真皮成纖維細胞 | 乳腺腫瘤自身抗原LMO4重組兔單克隆抗體 |
大鼠真皮成纖維細胞 | 5-氨基乙酰丙合1重組兔單克隆抗體 |
人冠狀動脈內(nèi)皮細胞 | 乙酰化組蛋白H4(K16)重組兔單克隆抗體 |
小鼠軟骨細胞 | 補體C1qα鏈多肽重組兔單克隆抗體 |
大鼠軟骨細胞 | 磷化周期E1重組兔單克隆抗體 |
人腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞 | 脂質(zhì)運載蛋白單克隆抗體 |
小鼠破骨細胞 | 微管蛋白重組兔單克隆抗體 |
大鼠破骨細胞 | 3-磷甘油醛脫氫（內(nèi)參）重組兔單克隆抗體 |
人髂動脈內(nèi)皮細胞 | 人肝內(nèi)膽管上皮細胞白介4重組兔單克隆抗體 |
小鼠皮膚肥大細胞 | 整合相關蛋白CD47重組兔單克隆抗體 |
大鼠皮膚肥大細胞 | 硫氧還蛋白單克隆抗體 |
小鼠前脂肪細胞 | 殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)