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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1753 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 胎盤組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
詳細介紹
一,、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1753 |
組織來源：胎盤組織
種屬來源：大鼠
細胞簡介：胎盤間充質(zhì)干細胞是一種多能干細胞 ,，是具有自我復(fù)制能力的多潛能細胞。在一 定條件下 ,，它可以分化成多種功能細胞,。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機體正 常的組織損傷修復(fù)過程中 ,， MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫,。在組織損 傷引起的特殊信號作用下 ,， MSC遷移到受損部位 ，在局部聚集增殖 ,，依據(jù)不同的 損傷信號沿著不同途徑分化,。 MSC易于分離擴增 ，體外倍增能力旺盛 ,，即使擴增 1億倍仍能保持其多向分化能力,。 因此 ， MSC是一種實用的組織修復(fù)種子細胞,。
相較于其他干細胞 ,，胎盤間充質(zhì)干細胞具有來源方便 ，細胞數(shù)量充足 ,，易于分離 ,、培養(yǎng)、擴增和純化 ,，傳代擴增30多代后仍具有干細胞特性,。胎盤是目前間充質(zhì) 干細胞的佳來源。
培養(yǎng)基：原代間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)：長梭狀細胞
傳代特性：根據(jù)細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣 ,，95%,； CO2 ， 5%
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞是一種貼壁生長細胞，細胞形態(tài)呈長梭狀細胞,，在技術(shù)部標(biāo)準操作流程下,，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗,。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
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