大鼠輸尿管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人舌鱗癌細胞,CAL-27細胞人舌鱗癌細胞,，SCC-9細胞人舌鱗癌細胞，Tca-8113細胞人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞，LN-18細胞人神經(jīng)母細胞瘤細胞,，SH-SY5Y細胞人神經(jīng)母細胞瘤細胞,，SK-N-SH細胞人神經(jīng)內(nèi)分泌分化的結(jié)腸癌細胞上皮細胞，LCC18細胞正輔因子4(PC4)ELISA試劑盒整合連鎖激(ILK)ELISA試劑盒整合關(guān)聯(lián)蛋白(IAP)ELISA試劑盒

一,、細胞基本屬性

 

組織來源：尿道組織

種屬來源：大鼠

細胞簡介：大鼠輸尿管上皮細胞分離自輸尿管組織,；輸尿管上接腎盂，下連膀胱,，是一對細長的管道,，呈扁圓柱狀，位于腹膜后,，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處),；一個在越過小骨盆入口處,；后一個在進入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石,、及壞死組織容易停留的部位,。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu)，即瓦耳代爾鞘,，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管,。臨床上將輸尿管分為上、中,、下三段,，也可稱為腹段、盆段,、膀胱段,。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處,，到跨越髂動脈處,；盆段，自髂動脈到膀胱壁,；膀胱段,，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口,。輸尿管管壁分為4層,，黏膜層、固有層,、肌層,、外膜,。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細胞,；固有層由細密的結(jié)締組織構(gòu)成,，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成,；外膜為疏松結(jié)締組織,，營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管。其中,，輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層,。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

傳代比例：1:2

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三,、使用方法

大鼠輸尿管上皮細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈上皮細胞樣，在技術(shù)部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。

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