產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X1472 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
組織來源 | 眼組織 | 種屬來源 | 人 |
上海撫生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價 | ¥9350 |
5×105 | 9350元 | 15 瓶 可售 |
更新時間:2024-03-19 15:45:17瀏覽次數(shù):415
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X1472 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
組織來源 | 眼組織 | 種屬來源 | 人 |
一,、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1472 |
組織來源:眼組織
種屬來源:人
細胞簡介:脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization ,,CNV)已成為眼科學領域的研究 熱點之一, 目前多數(shù)體外研究應用的是人臍靜脈內(nèi)皮細胞或主動脈內(nèi)皮細胞等容 易得到的大血管內(nèi)皮細胞,。由于血管內(nèi)皮細胞具有器官特異性和組織特異性,,用 大血管內(nèi)皮細胞的研究結(jié)果很難客觀、準確地解釋CNV的發(fā)生機制,。因此,, 建立 脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞(choroidal microvascular endothelial cells ,CEC)體外 培養(yǎng)體系,, 對深入研究CNV相關疾病具有十分重要的價值。
培養(yǎng)基:原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài):呈鵝卵石樣,,不規(guī)則細胞
傳代特性:細胞特性確定傳代
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相: 空氣,,95%;CO2 ,,5%
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞,,細胞形態(tài)呈呈鵝卵石樣,,不規(guī)則細胞,在技術(shù)部標準操作流程下,,細胞可傳2-3代,;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,,請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次,;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,,離心5min,,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3)經(jīng)1000rpm,,離心5min,丟棄上清,,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進行包被,,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗,;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通,;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,,詳盡告知細胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
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