人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠胎盤滋養(yǎng)層干細(xì)胞大鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞兔外根鞘細(xì)胞羊肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞兔脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞人頸動脈平滑肌細(xì)胞小鼠滑膜成纖維細(xì)胞NE 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白ELISA檢測試劑盒PF-4/CXCL4 兔子血小板因子4ELISA檢測試劑盒8-epi-PGF2α 兔8-異構(gòu)前列腺ELISA檢測試劑盒hs-CRP 兔超敏C反應(yīng)蛋白ELISA檢測試劑盒uPA

組織來源：患類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人的關(guān)節(jié)滑膜組織

種屬來源：人

細(xì)胞簡介：滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層,，淡紅色，  平滑閃光,，薄而柔潤,，由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)  節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu),，  除關(guān)節(jié)軟骨,、半月軟骨板以外,即便是通過關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌 帶等均全部為滑膜所包裹,?；し置诨海陉P(guān)節(jié)活動中起重要作用,。正?；? 分為兩層,，  即薄的細(xì)胞層(內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層)，是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜 ,，貼附于非關(guān)節(jié)面部分,，  覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上，不在軟骨面上,，此部分稱為  邊緣區(qū)或“裸區(qū)",。滑膜呈粉紅色,，  光滑發(fā)亮,、濕而潤滑，有時可見絨毛,，  內(nèi)含  膠原性纖維,。滑膜細(xì)胞有A,、  B兩型,。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞，表面有絲狀偽足,、漿  膜內(nèi)陷,、囊泡、線粒體,、溶酶體,、胞漿纖維和高爾基體，  具有吞噬功能,；  B型成纖 維樣滑膜細(xì)胞(FLS) ,，有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)，  是介導(dǎo) RA 關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞,。

培養(yǎng)基：原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞形態(tài)：成纖維樣細(xì)胞

傳代特性：細(xì)胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣,，95%；CO2 ,，5%
一,、細(xì)胞基本屬性

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞是一種貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈成纖維樣細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。