人臍動脈平滑肌細胞公司正在出售的產品：小鼠口腔粘膜成纖維細胞大鼠口腔粘膜成纖維細胞小鼠臍靜脈平滑肌細胞大鼠臍靜脈平滑肌細胞小鼠羊膜胚胎細胞大鼠羊膜胚胎細胞人瘢痕疙瘩成纖維細胞血小板生成(TPO)ELISA試劑盒血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒血小板反應蛋白/凝血敏

一,、細胞基本屬性

 

組織來源：臍帶組織

種屬來源：人

細胞簡介：臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和 臍靜脈,，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,，子宮動脈在 胎盤的母體部分出的毛細血管,，  與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體 和胎兒的血液間進行CO2和O2,，代謝產物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換,。臍動脈 將胎兒來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒,。

血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎,；  血管平滑肌細胞的異常增加的生長 潛力在血管疾病發(fā)生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,，  同時 從臍帶中分離人臍靜動平滑肌細胞方法相對成熟,，  使得體外培養(yǎng)的臍動脈平滑肌 細胞作為研究血管的模型細胞。

培養(yǎng)基：原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁培養(yǎng)

細胞形態(tài)：梭形細胞,，  不規(guī)則細胞

傳代特性：細胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣,，95%；CO2 ,，5%

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

人臍動脈平滑肌細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞，細胞形態(tài)呈梭形細胞,，  不規(guī)則細胞,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內,；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通,；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。

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