人腎小球系膜細胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠骨髓瘤B淋巴細胞SP2/MIL-6（種屬鑒定）人卵巢顆粒腫瘤細胞COV434(STR鑒定正確)小鼠主動脈內皮細胞MAEC（種屬鑒定）大鼠雪旺細胞RSC96（種屬鑒定）犬腎細胞MDCK(NBL-2)（種屬鑒定）人肝癌細胞QGY-7703 (STR鑒定正確)人白血病細胞BV-173(STR鑒定正確)肽基脯氨酰順反異構(PPI)ELISA試劑盒胎盤生長因子(PL

組織來源：腎組織

種屬來源：人

細胞簡介：人腎小球系膜細胞分離自腎小球組織,；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造,。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球,。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈,，而是流入出球小動脈,。在腎小球內，微血管受到高壓,，而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液,，滲入鮑氏囊內,。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率,。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質,，由系膜細胞和系膜基質組成。腎小球系膜細胞是腎小球內非?；钴S的細胞,，具有分泌細胞基質、產(chǎn)生細胞因子,、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能,。腎小球系膜細胞增生和基質的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張,、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法,。系膜細胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調節(jié),，以影響毛細血管袢的內壓和濾過率,；②支持作用，它填充于毛細血管袢之間,，支持毛細血管的位置,；③吞噬作用,，能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質；④分泌腎素,，在腎缺血或免疫復合物沉積時,，系膜細胞增生且分泌腎素。

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：PLL(0.1mg/ml)

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
一,、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

人腎小球系膜細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。