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詳細介紹
組織來源：食管組織
種屬來源：人
細胞簡介：人食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管,，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長,。食管可分為頸段,、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,，胸段位于左,、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,，腹段很短與胃相連,。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖,，由單層變?yōu)閺蛯?，食管使管腔變狹窄,，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn),。哺乳動物的食管結構上由內(nèi)向外分四層：黏膜層,、黏膜下層、肌層和外膜,。其中,，黏膜層，包括上皮,、固有層和黏膜肌層,。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦,，有保護作用,。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮,。食管被一層線性排列的,、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋,，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入,。特別的是,，層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講,，食管上皮由兩層組成,，基底層和分化層；其中,，僅基底層的細胞可以增殖,，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標記的依序表達,。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型,。
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人食管上皮細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1283 |
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
人食管上皮細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈上皮細胞樣，在技術部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠骨髓基質(zhì)細胞 | 人膽囊成纖維細胞 |
S100鈣結合蛋白P重組兔單克隆抗體 | STPG4蛋白抗體 |
大鼠腸成纖維細胞 | 磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體 |
大鼠毛囊干細胞 | 磷化酪氨蛋白激受體B1抗體 |
兔睪丸支持細胞 | 惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體 |
大鼠原代胸腺成纖維細胞 | 電子轉移黃蛋白脫氫抗體 |
兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞 | 轉錄因子ETV6抗體 |
人脂肪微血管內(nèi)皮細胞 | FAHD1蛋白抗體 |
兔皮膚成纖維細胞 | 下頜發(fā)育不良綜合征相關蛋白FAKD3抗體 |
兔下丘腦神經(jīng)元細胞 | 纖連蛋白2抗體 |
小鼠心肌細胞(胎鼠） | 叉頭相關結構域包含蛋白1抗體 |
兔視網(wǎng)膜muller細胞 | 人食管上皮細胞3號染色體開放閱讀框19抗體 |
兔腦動脈血管內(nèi)皮細胞 | 3號染色體開放閱讀框30抗體 |
兔膀胱上皮細胞 | 3號染色體開放閱讀框31抗體 |
兔破骨細胞 | 3號染色體開放閱讀框36抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
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