化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1458 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 種屬來(lái)源 | 人 |
詳細(xì)介紹
人CIK細(xì)胞
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng) | 人CIK細(xì)胞 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
商品貨號(hào) | A01X1458 |
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六,、室溫1 000×g離心8min，去上清液,。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻,，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠表皮角化細(xì)胞 | 兔牙周膜成纖維細(xì)胞 |
G-17單克隆抗體（包被抗體） | PE標(biāo)記的鋅指蛋白654抗體 |
兔胃粘膜上皮細(xì)胞 | PE標(biāo)記的串珠狀纖維結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 |
人羊膜成纖維細(xì)胞 | PE標(biāo)記的Ras樣蛋白A抗體 |
小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞 | PE標(biāo)記的橋粒斑蛋白1+2抗體 |
兔牙周膜干細(xì)胞 | PE標(biāo)記的糖尿病相關(guān)同源結(jié)構(gòu)域蛋白SIX5抗體 |
大鼠毛囊角質(zhì)細(xì)胞 | PE標(biāo)記的血小板-白細(xì)胞C激底物抗體 |
兔小膠質(zhì)細(xì)胞 | PE標(biāo)記的絲氨/蘇氨蛋白激Sgk3抗體 |
兔結(jié)腸成纖維細(xì)胞 | PE標(biāo)記的端粒結(jié)合蛋白2抗體 |
兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 | PE標(biāo)記的泛蛋白連接E3抗體 |
兔輸尿管平滑肌細(xì)胞 | PE標(biāo)記的FAM38A蛋白抗體 |
豬膀胱平滑肌細(xì)胞 | 人CIK細(xì)胞PE標(biāo)記的TAP-Tag（標(biāo)簽）單克隆抗體 |
大鼠T淋巴細(xì)胞 | PE標(biāo)記的HEXIM2蛋白抗體 |
小鼠纖維環(huán)細(xì)胞 | PE標(biāo)記的原癌基因M-ras抗體 |
大鼠原代頸動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 | PE標(biāo)記的基質(zhì)金屬蛋白3抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決,。
化工儀器網(wǎng)