小鼠骨髓肥大細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人胃腺癌細胞,；BGC-823人原位胰腺腺癌細胞；BxPC-3人結(jié)直腸腺癌細胞,；COLO320DM[COLO320DM]人結(jié)腸癌細胞,；CW-2人膽管細胞型肝癌細胞；HCCC-98人膽囊癌細胞,；GBC-SD[GBCSD]人肝癌細胞,；BEL-7402神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)ELISA試劑盒神經(jīng)型一氧化氮合(NOS1)ELISA試劑盒神經(jīng)酰胺激(CERK)ELISA試劑

組織來源：骨髓組織

種屬來源：小鼠

細胞簡介：小鼠骨髓肥大細胞分離自骨髓組織；肥大細胞（mast cell）為一種粒細胞,，存在于血液中的這類顆粒,，含有肝素、組織胺,、5-羥色胺,，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì)，可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)（炎癥）,。由于在肥大細胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸,，使細胞多陷于崩壞。細胞呈圓形或卵圓形,，細胞核小,，呈圓形或橢圓形，染色淺,，位于細胞中央,。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形,，細胞質(zhì)中充滿大小一致,、染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不建議傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
一,、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

小鼠骨髓肥大細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈圓形,，在技術(shù)部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。