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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1885 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 海綿體組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細介紹
組織來源：海綿體組織
種屬來源：小鼠
細胞簡介：小鼠海綿體內(nèi)皮細胞分離自海綿體組織；陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構成的血竇結構,，它主要包括海綿體內(nèi)皮細胞,、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質(zhì)的膠原中,，而海綿體內(nèi)皮細胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,，僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時,，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細胞與基膜的聯(lián)系,，破壞海綿體內(nèi)皮細胞間的緊密連接。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大,，平滑肌細胞和成纖維細胞也將被消化下來,，從而影響海綿體內(nèi)皮細胞的純度。因此，比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內(nèi)皮細胞的關鍵,。
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
包被條件：PLL(0.1mg/ml),，明膠(0.1%)
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠海綿體內(nèi)皮細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1885 |
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
小鼠海綿體內(nèi)皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈內(nèi)皮細胞樣,，在技術部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠腦成纖維細胞 | 細胞培養(yǎng)基 > 永生化細胞專用培養(yǎng)基 |
腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子重組兔單克隆抗體 | DNAJC22蛋白抗體 |
4T1+GFP 細胞專用培養(yǎng)基 | DNAJC4蛋白抗體 |
LN229+luc 細胞專用培養(yǎng)基 | 6號染色體開放閱讀框140抗體 |
MB49+luc 細胞專用培養(yǎng)基 | 6號染色體開放閱讀框151抗體 |
XWLC-05+GFP 細胞專用培養(yǎng)基 | 6號染色體開放閱讀框223抗體 |
PC12低分化+GFP 細胞專用培養(yǎng)基 | 8號染色體開放閱讀框59抗體 |
RM-1+luc 細胞專用培養(yǎng)基 | G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體 |
LX-2+GFP 細胞專用培養(yǎng)基 | 流感嗜血桿菌蛋白抗體 |
ID8+luc 細胞專用培養(yǎng)基 | 李斯特菌溶胞抗體 |
PANC02+luc 細胞專用培養(yǎng)基 | STAC2蛋白抗體 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞永生化+GFP 細胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠海綿體內(nèi)皮細胞A型病毒H7N9 M1蛋白抗體 |
HGC-27+YFP 細胞專用培養(yǎng)基 | 細胞色B561結構域蛋白1抗體 |
ZR-75-1+luc 細胞專用培養(yǎng)基 | DNAJC13蛋白抗體 |
人主動脈內(nèi)皮細胞永生化 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的磷化雷帕霉靶蛋白抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
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