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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1984 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 正常鼓膜組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
組織來源：正常鼓膜組織
種屬來源：小鼠
細(xì)胞簡介：鼓膜也稱耳膜,，為一彈性灰白色半透明薄膜,，將外耳道與中耳隔開。鼓膜穿孔不能愈合,，可能與干細(xì)胞受損或增殖抑制有關(guān),。鼓膜上皮干細(xì)胞的分布與鼓膜的血供豐富的區(qū)域一致。
鼓膜上皮干細(xì)胞高表達(dá)β1整合素，有很強(qiáng)的黏附型,，對Ⅳ型膠原的黏附鼻其他細(xì)胞更快,、更強(qiáng),。
培養(yǎng)基：原代角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：鋪路石狀,，不規(guī)則細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1984 |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三,、使用方法
小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈鋪路石狀,，不規(guī)則細(xì)胞,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人表皮黑色細(xì)胞 | MHCC-97H+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
程序性細(xì)胞死亡6-相互作用蛋白重組兔單克隆抗體 | 乙型肝炎病毒X抗原激活蛋白5抗體 |
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U87MG+RFP 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 脂肪去飽和6抗體 |
U251MG/TMZ+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞TOMM20L蛋白抗體 |
A549+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | DIM-7蛋白抗體 |
大鼠脂肪干細(xì)胞+RFP 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 藍(lán)色敏感的視色 (厚皮螺旋體) 抗體 |
A375-EGFP 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | FAM59B蛋白抗體 |
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時(shí)間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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