小鼠骨髓巨噬細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人肝癌細(xì)胞,；QGY-7701[QGY7701]人前列腺癌細(xì)胞；PC-3[PC3]人肝癌細(xì)胞,；QGY-7703[QGY7703]人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞,；RD人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；SHG-44[SHG44]黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞,；RAJI人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞,；SK-N-MC神經(jīng)絲束蛋白(NPTN)ELISA試劑盒神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)ELISA試劑盒神經(jīng)束蛋白(NFAS

一、細(xì)胞基本屬性

 

組織來源：正常骨髓組織

種屬來源：小鼠

細(xì)胞簡介：巨噬細(xì)胞源自單核細(xì)胞,，屬于免疫細(xì)胞,，有多種功能，屬不繁殖細(xì)胞群,，難以長期培養(yǎng),。

巨噬細(xì)胞在吞噬和清除異物和衰老死亡細(xì)胞、分泌生物活性物質(zhì),，調(diào)節(jié)血細(xì)胞生成與參與免疫應(yīng)答等方面發(fā)揮著廣泛的生物學(xué)作用,，是一類在體內(nèi)發(fā)揮重要免疫效應(yīng)的細(xì)胞，為體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)維持和組織防御提供保障,。

培養(yǎng)基：原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：圓形,，不規(guī)則細(xì)胞

傳代特性：本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，增殖能力很弱,，建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實驗,，不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),。

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

小鼠骨髓巨噬細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈圓形，不規(guī)則細(xì)胞,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗,。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。

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