小鼠骨髓巨噬細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人肝癌細胞；QGY-7701[QGY7701]人前列腺癌細胞,；PC-3[PC3]人肝癌細胞,；QGY-7703[QGY7703]人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞；RD人膠質瘤細胞,；SHG-44[SHG44]黑人Burkitt淋巴瘤細胞,；RAJI人神經(jīng)上皮瘤細胞；SK-N-MC神經(jīng)絲束蛋白(NPTN)ELISA試劑盒神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)ELISA試劑盒神經(jīng)束蛋白(NFAS

一,、細胞基本屬性

 

組織來源：正常骨髓組織

種屬來源：小鼠

細胞簡介：巨噬細胞源自單核細胞,，屬于免疫細胞，有多種功能,，屬不繁殖細胞群,，難以長期培養(yǎng)。

巨噬細胞在吞噬和清除異物和衰老死亡細胞、分泌生物活性物質,，調節(jié)血細胞生成與參與免疫應答等方面發(fā)揮著廣泛的生物學作用,，是一類在體內(nèi)發(fā)揮重要免疫效應的細胞，為體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)維持和組織防御提供保障,。

培養(yǎng)基：原代巨噬細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：圓形,，不規(guī)則細胞

傳代特性：本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱,，建議客戶收到細胞后直接用于后續(xù)實驗,，不要進行擴增培養(yǎng)。

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三,、使用方法

小鼠骨髓巨噬細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈圓形,，不規(guī)則細胞,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。

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