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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1810 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 結(jié)腸組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細介紹
組織來源：結(jié)腸組織
種屬來源：小鼠
細胞簡介：小鼠結(jié)腸平滑肌細胞分離自結(jié)腸組織,；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁,，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜(上皮層,、固有層,、黏膜肌層)，黏膜下層(疏松結(jié)締組織),，肌層(內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑肌)，外膜(纖維膜或漿膜),。結(jié)腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形,、外縱行平滑?。唤Y(jié)腸運動少而緩慢,，對刺激的反應(yīng)也較遲緩,。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質(zhì)分泌,、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用,。結(jié)腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)：大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。結(jié)腸平滑肌運動活性受到神經(jīng)遞質(zhì)、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié),。隨著現(xiàn)代胃腸動力學(xué)研究的進展,，對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發(fā)展到細胞,、分子水平,，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學(xué)等實驗,。體外培養(yǎng)細胞,，由于影響因素單一，是研究細胞功能以及相應(yīng)的細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的基礎(chǔ)。
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
一,、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠結(jié)腸平滑肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1810 |
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
小鼠結(jié)腸平滑肌細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,，在技術(shù)部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗,。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞 | HCT-8 細胞專用培養(yǎng)基 |
4-羥基壬烯醛抗體 | 堿性磷（AP）標記的少突膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)錄因子3抗體 |
Hep 3B2.1-7 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的三碘甲狀腺T3抗體 |
HELA-S3 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的唾液轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液轉(zhuǎn)移抗體 |
HeLa 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 |
HEL 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的磷化蛋白激C亞性D型抗體 |
HEK-293T 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的X連鎖生長調(diào)控因子GCFX抗體 |
HEK-293A 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的胱抑SN/半胱氨蛋白抑制劑SN抗體 |
HEK-293 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的細胞分裂周期樣蛋白20抗體 |
HEC-1-B 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的α彈性蛋白抗體 |
HEC-1-A 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體 |
HCT-116 細胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠結(jié)腸平滑肌細胞堿性磷（AP）標記的BXDC1蛋白抗體 |
HCT-15/Taxol 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的黃腺嘌呤二核苷抗體 |
HCT-15/Fu 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的組蛋白H4 K20甲基轉(zhuǎn)移抗體 |
HS578T 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的SPRED2蛋白抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
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