化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1973 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 眼組織 | 種屬來(lái)源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
小鼠晶狀體上皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：ECM基礎(chǔ)培養(yǎng)基：,，F(xiàn)BS，Penicillin,，Streptomycin等,；
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：小鼠晶狀體上皮細(xì)胞分離自眼組織；晶狀體位于玻璃體前面,，周?chē)删铙w懸韌帶與睫狀體相連,，呈雙凸透鏡狀，富有彈性,。晶狀體為一個(gè)雙凸面透明組織,，被懸韌帶固定懸掛在虹膜之后玻璃體之前,。晶體是眼球屈光系統(tǒng)的重要組成部分,，也是具有調(diào)節(jié)能力的屈光間質(zhì)，其調(diào)節(jié)能力隨著年齡的增長(zhǎng)而逐漸降低,，形成老視現(xiàn)象,。晶狀體囊為一透明薄膜，完整地包圍在晶狀體外面。前囊下有一層上皮細(xì)胞,，當(dāng)上皮細(xì)胞到達(dá)赤道部后,，不斷伸長(zhǎng)、彎曲,，移向晶狀體內(nèi),，成為晶狀體纖維。
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng) | 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X1973 |
組織來(lái)源 | 眼組織 | 種屬來(lái)源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六,、室溫1 000×g離心8min，去上清液,。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min,，4℃離心，去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min,，4℃),，1000×g，4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 | MET-5A 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 |
抗利尿激/血管升壓/加壓/血管加壓抗體 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的磷化腎上腺能受體β2抗體 |
NCTC clone 929 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 |
L6 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的細(xì)胞質(zhì)和紡錘體機(jī)化蛋白A抗體 |
kyse30 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的AICAR甲?；D(zhuǎn)移抗體 |
KU812 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的單核細(xì)胞趨化蛋白5抗體 |
KNS-89 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的微管聚合促進(jìn)蛋白3抗體 |
KB 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的雙特異性蛋白磷7抗體 |
MDA-MB-435S 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的肌相關(guān)蛋白DAG1抗體 |
MDA-MB-453 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的信號(hào)通路Wnt6抗體 |
MDA-MB-436 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體 |
MDA-MB-468 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞堿性磷（AP）標(biāo)記的組織蛋白q抗體 |
MDCK 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的8/第八/第八因子相關(guān)抗原輕鏈抗體 |
MEF 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的粒細(xì)胞分化相關(guān)標(biāo)志物MYADM抗體 |
NCI-H23 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的STOX1蛋白抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決,。
化工儀器網(wǎng)