小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品：小鼠腎小管上皮細(xì)胞HFF-1人皮膚成纖維細(xì)胞HGC-27人胃癌細(xì)胞HGC-27+YFP人胃癌細(xì)胞黃色熒光標(biāo)記HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞HKb-20人腎上皮細(xì)胞HL 60（hl-60）人早幼粒白血病細(xì)胞HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞HMC3人小膠質(zhì)細(xì)胞HMEC-1人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞HOS人骨肉瘤細(xì)胞HPAC人胰腺癌細(xì)胞huh

小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞

培養(yǎng)基：MSCM基礎(chǔ)培養(yǎng)基：,，F(xiàn)BS，Penicillin,，Streptomycin等,；

包被條件：PLL(0.1mg/ml)

傳代特性：不建議傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞分離自腦組織；三叉神經(jīng)為十二對(duì)腦神經(jīng)之中的第五對(duì)腦神經(jīng),，是混合性腦神經(jīng)之一,。三叉神經(jīng)由兩種纖維成分所組成。一種是一般軀體感覺(jué)纖維,，其神經(jīng)元胞體位于顱中窩顳骨巖部三叉神經(jīng)壓跡處,、由假單極神經(jīng)元組成的三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)。三叉神經(jīng)節(jié)的中樞突組成三叉神經(jīng)感覺(jué)根,，在腦干腦橋臂和腦橋基底部交界處入腦,，傳到頭面部觸覺(jué)的神經(jīng)纖維終止于三叉神經(jīng)腦橋核，傳到溫覺(jué),、痛覺(jué)的神經(jīng)纖維終止于三叉神經(jīng)脊束核,。另一種纖維是特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維，起源于特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)核之中的三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核,，三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核發(fā)出來(lái)的特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維成分組成三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)根,，從腦橋臂和基底部交界處出腦，纖維成分加入到三叉神經(jīng)第三大分支下頜神經(jīng)內(nèi)支配咀嚼肌等肌肉的運(yùn)動(dòng),。
一,、細(xì)胞基本屬性

原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。

實(shí)驗(yàn)步驟：

一,、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。

三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。

四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì)。

五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。

六、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。

七、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g，20min,，4℃離心,，去上清。

八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min,，去上清液,。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。

十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。

加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

注意事項(xiàng)：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決,。