小鼠乳腺上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人支氣管上皮樣細(xì)胞,；BEAS-2B樹鼩胎肺成纖維樣細(xì)胞；TS-EL-1樹鼩胎心成纖維樣細(xì)胞,；TS-EH-1社鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞,；CWBRT社鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞；CWBRT11大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞,；BOS-1樹鼩胎皮膚成纖維樣細(xì)胞,；TS-ES-1肌球蛋白ⅢB(MYO3B)ELISA試劑盒肌球蛋白ⅢA(MYO3A)ELISA試劑盒肌球蛋白ⅠH(MYO1H)ELIS

一、細(xì)胞基本屬性

 

組織來源：乳腺組織

種屬來源：小鼠

細(xì)胞簡介：小鼠乳腺上皮細(xì)胞分離自乳腺組織,；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,，主要由腺上皮細(xì)胞組成，并具有特殊的泌乳功能,。在妊娠期,，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌,、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系,，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,，腺泡是分泌乳汁的重要部分,。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控，其中乳腺表達(dá)的生長因子對乳腺上皮細(xì)胞的增殖,、分化,、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮細(xì)胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織,，為貼壁生長型細(xì)胞,，呈多角形、圓形以及短梭形,；乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能,。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代左右

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

小鼠乳腺上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進(jìn)行包被,，以增強細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。

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