化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1797 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 腎組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細介紹
小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
包被條件：PLL(0.1mg/ml),，明膠(0.1%)
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞簡介：小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,，以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素,、促紅細胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行,。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi),，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管,，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈,，出腎小體,。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈,，入弓狀靜脈,、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,，注入下腔靜脈,。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機能血管,，與腎泌尿機能密切相關(guān),。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng),，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿,；球后毛細血管網(wǎng),，血壓較低，利于腎小管的重吸收,。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用,，③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
一,、細胞基本屬性
細胞名稱 | 小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞 | 商品貨號 | A01X1797 |
組織來源 | 腎組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min,，4℃離心，去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠海綿體內(nèi)皮細胞 | Hep3B2.1-7 [Hep3B]人肝癌細胞專用培養(yǎng)基 |
微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體 | APC標記的1號染色體開放閱讀框191抗體 |
HEL人紅白白血病細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的3'-5'外切1蛋白抗體 |
HELA人子宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的22號染色體開放閱讀框26抗體 |
HELA人子宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的多聚腺苷結(jié)合蛋白相互作用蛋白2抗體 |
HELA+LUC人宮頸癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的藍色敏感的視色抗體 |
HELA+LUC人宮頸癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的谷氨半胱氨γ合成抗體 |
HET-1A人食管上皮細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體 |
chang liver人宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
chang liver人宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的KMO蛋白抗體 |
HeLa.S3人宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的磷化色氨羥化抗體 |
HeLa.S3人宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞APC標記的環(huán)指蛋白190抗體 |
hepg2.2.15人肝癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的胞脫氨抗體 |
hepg2.2.15人肝癌細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的組織胺H4受體抗體 |
HGC-27+YFP人胃癌黃色熒光標記細胞專用培養(yǎng)基 | APC標記的RNA結(jié)合蛋白24抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
化工儀器網(wǎng)