小鼠神經(jīng)干細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人結直腸腺癌細胞,；COLO320DM[COLO320DM]小鼠皮膚黑色瘤細胞,；B16-F小鼠胰島瘤胰島β細胞；Beta-TC-6大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化),；PC-12(低分化)大鼠骨肉瘤細胞,；UMR-6大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)；PC-12(高分化)小鼠結腸癌細胞,；CT26.WT黑皮質激5受體(MC5R)ELISA試劑盒黑皮質激4受體(MC4R)E

組織來源：腦組織

種屬來源：小鼠

細胞簡介：小鼠神經(jīng)干細胞分離自腦皮層組織,；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,，即外側面(約占整個皮質面積的1/3),、內側面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回,，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂,、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉,、頂葉,、顳葉、枕葉四大部分,。神經(jīng)干細胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元,、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力，能自我更新,，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群,。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞,。需要強調的是,，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,，不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同,，分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種,，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力,，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力,，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,，對損傷和疾病具有反應能力。神經(jīng)干細胞在疾病,、損傷狀態(tài)下具有增殖,、遷移，并向神經(jīng)細胞,、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提,。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后,，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基：中呈懸浮生長,，予以更換半量培基,，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細胞懸液，將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個細胞/瓶,，每7-10d傳代1次,，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基：1次，培養(yǎng)條件：不變,。

培養(yǎng)基：含B-27 Supplement,、EGF、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細胞形態(tài)：球形

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰dan白酶，Accutase

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

傳代比例：1:2
一,、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

小鼠神經(jīng)干細胞是一種懸浮細胞,，細胞形態(tài)呈球形,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內,；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。