小鼠食管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：雜交瘤細(xì)胞,；19A4人喉表皮樣癌細(xì)胞,；HEp-2-NS1雜交瘤細(xì)胞；3G4雜交瘤細(xì)胞,；2B1高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞,；MHCC97H-GFP-LC3雜交瘤細(xì)胞；M08#15高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞,；HCCLM3-GFP-LC3骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)ELISA試劑盒骨成型蛋白7(BMP7)ELISA試劑盒骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒骨成型蛋白3(BMP

組織來源：食管組織

種屬來源：小鼠

細(xì)胞簡介：小鼠食管上皮細(xì)胞分離自食管組織,；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,，隨著頸部的伸長和心肺的下降,，而逐漸增長。食管可分為頸段,、胸段和腹段,。 脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左,、右肺之間的縱膈內(nèi),，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連,。在發(fā)育過程中,，食管的上皮細(xì)胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層,，食管使管腔變狹窄,，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn),。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層,、黏膜下層、肌層和外膜,。其中,，黏膜層，包括上皮,、固有層和黏膜肌層,。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦,，有保護(hù)作用,。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮,。食管被一層線性排列的,、無角化、 潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋,，其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,，防止食管內(nèi)容物的滲入,。特別的是，層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層 細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下,。從組織學(xué)上講,，食管 上皮由兩層組成，基底層和分化層,；其中,，僅基底層的細(xì)胞可以增殖，然后向食管腔移行 ,。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá),。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正 常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型。

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
一,、細(xì)胞基本屬性

二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三、使用方法

小鼠食管上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗,。

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。