小鼠牙齦成纖維細胞公司正在出售的產品：小鼠雜交瘤細胞株,；MT9C人膽管癌細胞,；LIPF178C小鼠雜交瘤細胞株,；DCBX5B1小鼠雜交瘤細胞株；8D6小鼠雜交瘤細胞株,；NT4D12小鼠雜交瘤細胞株,；DMEQ1A3小鼠雜交瘤細胞株；DBP3B2低氧上調節(jié)因子1(HYOU1)ELISA試劑盒低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP6)ELISA試劑盒低密度脂蛋白受體相關蛋白4(LRP4)ELISA試劑盒低密

一,、細胞基本屬性

 

組織來源：牙齦組織

種屬來源：小鼠

細胞簡介：小鼠牙齦成纖維細胞分離自牙齦組織,；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色,、有光澤,、質堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣,，正常呈月芽形,。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,，通稱牙床,；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色,，內有很多血管和神經,。牙齦表面為復層鱗狀上皮，有角化層或不全角化層,。上皮釘較長,，伸入結締組織。牙齦上皮不僅覆蓋牙齦外露部分,，而且也轉向內側,，覆蓋齦溝壁稱為溝內上皮；一部分附著在牙體上稱為結合上皮,。牙齦的固有層為各種方向交織的結締組織纖維束,，其中主要的成分是膠原纖維，它占全部結締組織56%,。牙齦中為數多的細胞為成纖維細胞,，肥大細胞也常在牙齦中出現，此外還有淋巴細胞,、漿細胞和巨噬細胞,。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳1-3代左右

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三,、使用方法

小鼠牙齦成纖維細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣，在技術部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內,；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通,；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。

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