小鼠牙齦成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；MT9C人膽管癌細(xì)胞；LIPF178C小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；DCBX5B1小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；8D6小鼠雜交瘤細(xì)胞株；NT4D12小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；DMEQ1A3小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；DBP3B2低氧上調(diào)節(jié)因子1(HYOU1)ELISA試劑盒低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP6)ELISA試劑盒低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP4)ELISA試劑盒低密

一、細(xì)胞基本屬性

 

組織來(lái)源：牙齦組織

種屬來(lái)源：小鼠

細(xì)胞簡(jiǎn)介：小鼠牙齦成纖維細(xì)胞分離自牙齦組織,；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,，呈粉紅色、有光澤,、質(zhì)堅(jiān)韌,。牙齦邊緣稱(chēng)為齦緣，正常呈月芽形,。齦緣與牙頸之間的小溝稱(chēng)齦溝,。兩鄰牙之間的牙齦突起稱(chēng)齦乳突。也叫齒齦,，通稱(chēng)牙床,；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色,，內(nèi)有很多血管和神經(jīng),。牙齦表面為復(fù)層鱗狀上皮，有角化層或不全角化層,。上皮釘較長(zhǎng),，伸入結(jié)締組織,。牙齦上皮不僅覆蓋牙齦外露部分，而且也轉(zhuǎn)向內(nèi)側(cè),，覆蓋齦溝壁稱(chēng)為溝內(nèi)上皮,；一部分附著在牙體上稱(chēng)為結(jié)合上皮。牙齦的固有層為各種方向交織的結(jié)締組織纖維束,，其中主要的成分是膠原纖維,，它占全部結(jié)締組織56%。牙齦中為數(shù)多的細(xì)胞為成纖維細(xì)胞,，肥大細(xì)胞也常在牙齦中出現(xiàn),，此外還有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。

培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-3代左右

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三、使用方法

小鼠牙齦成纖維細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。

客戶(hù)收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴(lài)氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

四,、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。

4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決,。

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