化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1905 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 脂肪組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡介：微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染,、休克,、腫瘤、血管疾病等多種疾病和綜合癥發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ),。一旦微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損,，必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常的生物學(xué)功能,，引起多種疾病的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系,。微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌前列環(huán)素,、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì),，來維持血管的正常狀態(tài),。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 商品貨號 | A01X1905 |
組織來源 | 脂肪組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 鋪路石狀細(xì)胞 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一,、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二,、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,，去除小腦和間腦。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六,、室溫1 000×g離心8min，去上清液,。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min,，4℃離心，去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min,，4℃),，1000×g，4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 | PC12低分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 低分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
HMGCR重組兔單克隆抗體 | Cy3標(biāo)記的緊密連接蛋白14抗體 |
IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的富含半胱氨性分泌/骨粘連蛋白多糖抗體 |
IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的CD28抗體 |
INS-1大鼠胰島瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的磷化微管相關(guān)蛋白抗體 |
INS-1大鼠胰島瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的p53結(jié)合蛋白1抗體 |
L6大鼠成肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的氯吡脲 |
L6大鼠成肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體 |
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的嗅覺受體51B5抗體 |
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的溶質(zhì)載體家族6成員18抗體 |
NRK-49F正常大鼠腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的細(xì)胞角蛋白74抗體 |
NRK-49F正常大鼠腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞Cy3標(biāo)記的宿主細(xì)胞因子2抗體 |
NRK-52E大鼠腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的鄰苯二酚O甲基移位結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 |
NRK-52E大鼠腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的蛋白激A錨定蛋白7抗體 |
RLE-6TN大鼠肺泡II型細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | Cy3標(biāo)記的突觸核膜蛋白1抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時(shí)間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)