產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | A01X1883 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 子宮組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價 | ¥4250 |
5×105 | 4250元 | 15 瓶 可售 |
更新時間:2024-03-26 13:23:02瀏覽次數(shù):1297
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X1883 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 子宮組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,,可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5,;基底層較薄較致密,,約占1/5,功能層可剝脫,,而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能:①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜,是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,;②子宮內(nèi)膜對動情素和孕激素都起反應(yīng),,因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化,。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān),,在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話"的過程中,,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,,在動物生殖生理活動中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 | 商品貨號 | A01X1883 |
組織來源 | 子宮組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路:
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,,經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,,再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。
實(shí)驗(yàn)步驟:
一,、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min,。
二,、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,,去除小腦和間腦。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì),。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,,放入50ml的離心管中,,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,,200-400U DNaseI),,混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六,、室溫1 000×g離心8min,,去上清液。
七,、沉淀中加入20%BSA重懸浮,,充分混勻,1 000×g,,20min,,4℃離心,,去上清。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,,混勻,,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,,去上清液,。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,,4℃),,1000×g,4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,,6min,,室溫),去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,置于37℃,、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液,。
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注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,yi酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通,;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。