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小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

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5×1054250元15 瓶 可售
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更新時間:2024-03-26 13:23:02瀏覽次數(shù):1297

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1883 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
組織來源 子宮組織 種屬來源 小鼠
小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞PNT2細(xì)胞PSN-1細(xì)胞PTA-556細(xì)胞PTEN-P8細(xì)胞QGP-1細(xì)胞QGY-7703細(xì)胞R2C細(xì)胞Ramos細(xì)胞Ramos-2G6-4C10細(xì)胞Raw2647,C17細(xì)胞RCC10RGB細(xì)胞RC-K8細(xì)胞RT4-D6P2T細(xì)胞RD-ES細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

細(xì)胞簡介:小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,,可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5,;基底層較薄較致密,,約占1/5,功能層可剝脫,,而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能:①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜,是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,;②子宮內(nèi)膜對動情素和孕激素都起反應(yīng),,因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化,。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān),,在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話"的過程中,,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,,在動物生殖生理活動中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱

小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

商品貨號

A01X1883

組織來源

子宮組織

種屬來源

小鼠

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

生長特性

貼壁

換液頻率

2-3天換液一次

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣


原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路:

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機(jī)體中取出,,經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,,再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。

6.jpg

實(shí)驗(yàn)步驟:

一,、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min,。

二,、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,,去除小腦和間腦。

三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì),。

五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,,放入50ml的離心管中,,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,,200-400U DNaseI),,混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六,、室溫1 000×g離心8min,,去上清液。

七,、沉淀中加入20%BSA重懸浮,,充分混勻,1 000×g,,20min,,4℃離心,,去上清。

八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,,混勻,,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,,去上清液,。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,,4℃),,1000×g,4℃離心10min,。

十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,,6min,,室溫),去上清液,。

加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,置于37℃,、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液,。

2.png
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注意事項:

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,,yi酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通,;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。


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