化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1489 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 胎盤組織 | 種屬來源 | 人 |
詳細(xì)介紹
人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
傳代特性：細(xì)胞特性確定傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相： 空氣,，95%,；CO2 ，5%
細(xì)胞簡介：胎盤是人類妊娠期間由胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的器官,。 胎兒在子宮中發(fā)育,， 依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性,。 胎盤 對(duì)胎兒的正常發(fā)育起著至關(guān)重要的作用,， 而良好的胎盤血管網(wǎng)絡(luò)的形成，是維持 正常妊娠的前提,。作為胎盤血管床的主要構(gòu)成部分之一,， 胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞參 與胎盤血管形成與重塑、調(diào)節(jié)血管舒縮,， 在維持胎盤血管床的血流穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著 重要作用,。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X1489 |
組織來源 | 胎盤組織 | 種屬來源 | 人 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁培養(yǎng) |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣,，多角形細(xì)胞 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一,、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二,、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,，去除小腦和間腦。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì),。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min,，4℃離心，去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液,。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min，4℃),，1000×g,，4℃離心10min。
十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞 | 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 |
IKZF1重組兔單克隆抗體 | 19號(hào)染色體開放閱讀框2抗體 |
豬乳腺成纖維細(xì)胞 | 19號(hào)染色體開放閱讀框25抗體 |
小鼠牙髓干細(xì)胞 | 19號(hào)染色體開放閱讀框44抗體 |
人主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞 | 19號(hào)染色體開放閱讀框48抗體 |
小鼠腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 19號(hào)染色體開放閱讀框77抗體 |
小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞 | 磷化補(bǔ)體成分5受體1抗體 |
人乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子7抗體 |
小鼠腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 | 殺菌肽B/天蠶抗菌肽B抗體 |
小鼠肺微血管周細(xì)胞 | 牙骨質(zhì)蛋白1抗體 |
大鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞 | 著絲粒蛋白M抗體 |
兔胃平滑肌細(xì)胞 | 人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞著絲粒蛋白Q抗體 |
小鼠真皮毛乳頭干細(xì)胞 | 胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體 |
小鼠腦血管周細(xì)胞 | 磷化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體 |
人肝成纖維細(xì)胞 | CENTD1蛋白抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
化工儀器網(wǎng)