人小腸成纖維細胞公司正在出售的產品：大鼠乳腺癌細胞SHZ-88（種屬鑒定）人結腸癌細胞綠色熒光標記SW620+GFP(STR鑒定正確)結腸腺癌細胞SW48(STR鑒定正確)人多發(fā)性骨髓瘤細胞OPM-2(STR鑒定正確)人腎上皮細胞Hkb20 (STR鑒定正確)人肺成纖維細胞HFL1(STR鑒定正確)草魚腎臟細胞(CIK)（種屬鑒定）黏多糖/糖胺聚糖ELISA試劑盒內質網蛋白29(ERP29/C12

組織來源：小腸組織

種屬來源：人

細胞簡介：小腸位于腹中，  上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連,，  是食物消化吸  收的主要場所。一般根據形態(tài)和結構變化將小腸分為三段,，分別為十二指腸,，空  腸和回腸。小腸壁結構一般分4層,，由外向內依次為：漿膜層,，  平滑肌層，粘膜下 層和粘膜層,。粘膜層又分為3層：  靠近粘膜下層的是一層平滑肌,，稱為粘膜肌層。 其次為結締組織,，又稱為固有層,。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的粘  膜。  成纖維細胞是結締組織中常見的細胞,，  電鏡下,，成纖維細胞胞質內可見豐  富的粗面內質網、游離核糖體和高爾基復合體,，表明其具有合成和分泌蛋白質的  功能,。己知成纖維細胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細胞外基質，  在組  織器官纖維化過程中發(fā)揮重要作用,。

培養(yǎng)基：原代成纖維細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁培養(yǎng)

細胞形態(tài)：成纖維樣細胞

傳代特性：細胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣,，95%,；CO2 ,，5%
一、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三,、使用方法

人小腸成纖維細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞，細胞形態(tài)呈成纖維樣細胞，在技術部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。

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四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通,；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。