人小腸成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：大鼠乳腺癌細胞SHZ-88（種屬鑒定）人結腸癌細胞綠色熒光標記SW620+GFP(STR鑒定正確)結腸腺癌細胞SW48(STR鑒定正確)人多發(fā)性骨髓瘤細胞OPM-2(STR鑒定正確)人腎上皮細胞Hkb20 (STR鑒定正確)人肺成纖維細胞HFL1(STR鑒定正確)草魚腎臟細胞(CIK)（種屬鑒定）黏多糖/糖胺聚糖ELISA試劑盒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29(ERP29/C12

組織來源：小腸組織

種屬來源：人

細胞簡介：小腸位于腹中，  上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連,，  是食物消化吸  收的主要場所。一般根據(jù)形態(tài)和結構變化將小腸分為三段,，分別為十二指腸,，空  腸和回腸。小腸壁結構一般分4層，由外向內(nèi)依次為：漿膜層,，  平滑肌層,，粘膜下 層和粘膜層。粘膜層又分為3層：  靠近粘膜下層的是一層平滑肌,，稱為粘膜肌層,。 其次為結締組織，又稱為固有層,。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的粘  膜,。  成纖維細胞是結締組織中常見的細胞，  電鏡下,，成纖維細胞胞質(zhì)內(nèi)可見豐  富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、游離核糖體和高爾基復合體，表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的  功能,。己知成纖維細胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細胞外基質(zhì),，  在組  織器官纖維化過程中發(fā)揮重要作用。

培養(yǎng)基：原代成纖維細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁培養(yǎng)

細胞形態(tài)：成纖維樣細胞

傳代特性：細胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣,，95%,；CO2 ，5%
一,、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

人小腸成纖維細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞,，細胞形態(tài)呈成纖維樣細胞,，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。