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詳細介紹
一,、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1672 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞 | 小鼠單核細胞 |
高密度脂蛋白受體/清道夫受體重組兔單克隆抗體 | 膠體金標記的淋巴限制膜蛋白Jaw1抗體 |
小鼠表皮干細胞 | 膠體金標記的互養(yǎng)蛋白3抗體 |
小鼠前脂肪細胞 | 膠體金標記的CoREST2蛋白抗體 |
小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細胞 | 膠體金標記的FAM149B1蛋白抗體 |
小鼠真皮毛乳頭細胞 | 膠體金標記的色氨羥化抗體 |
小鼠外根鞘細胞 | 膠體金標記的三碘甲狀腺T3抗體 |
小鼠毛囊角質(zhì)細胞 | 膠體金標記的甲狀腺激受體相互作用蛋白4抗體 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞 | 膠體金標記的巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體 |
小鼠脂肪干細胞 | 膠體金標記的磷化RET原癌基因抗體 |
小鼠滑膜間充質(zhì)干細胞 | 膠體金標記的真核翻譯起始因子2C1抗體 |
小鼠毛囊干細胞 | 大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞膠體金標記的糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移1抗體 |
小鼠膈肌細胞 | 膠體金標記的微管相關(guān)絲氨/蘇氨激3抗體 |
小鼠肌腱成纖維細胞 | 膠體金標記的磷化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
小鼠T淋巴細胞 | 膠體金標記的細胞表面受體PILRβ抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
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