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詳細介紹
大鼠耳軟骨細胞
一,、細胞基本屬性
細胞名稱 | 大鼠耳軟骨細胞 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
商品貨號 | A01X1673 |
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四,、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì),。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠尿道上皮細胞 | 小鼠腦動脈血管內(nèi)皮細胞 |
冠狀病毒2 Spike S1單克隆抗體 | 膠體金標記的舞蹈癥相關(guān)蛋白1抗體 |
小鼠椎體終板軟骨細胞 | 膠體金標記的干擾epsilon 1蛋白抗體 |
小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞 | 膠體金標記的原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 |
小鼠耳軟骨細胞 | 膠體金標記的EDEM1蛋白抗體 |
小鼠骨膜干細胞 | 膠體金標記的腎小球上皮蛋白1抗體 |
小鼠中耳上皮細胞 | 膠體金標記的溶質(zhì)載體家族6成員18抗體 |
小鼠肌腱干細胞 | 膠體金標記的同源盒蛋白SIX4抗體 |
小鼠肌腱細胞 | 膠體金標記的磷化蛋白激C亞性D型抗體 |
小鼠椎體終板軟骨干細胞 | 膠體金標記的G蛋白偶聯(lián)受體30抗體 |
小鼠骨髓基質(zhì)干細胞 | 膠體金標記的GTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性腎功能衰竭蛋白） |
小鼠脂肪血管基質(zhì)細胞 | 大鼠耳軟骨細胞膠體金標記的瞬時受體電位離子通道蛋白4抗體（M亞家族） |
小鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細胞 | 膠體金標記的補體C3IP1抗體 |
小鼠B淋巴細胞 | 膠體金標記的肺癌相關(guān)蛋白8抗體 |
小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞 | 膠體金標記的唾液轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液轉(zhuǎn)移抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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