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大鼠胃黏膜成纖維細(xì)胞

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    經(jīng)銷商
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    上海市

規(guī)格
5×1053350元15 瓶 可售
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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):313

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1577 主要用途 僅供科研實驗
種屬來源 大鼠    
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詳細(xì)介紹

5.jpg

一,、細(xì)胞基本屬性

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

商品貨號

大鼠胃黏膜成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

A01X1577

二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三、使用方法

客戶收到細(xì)胞后,,請按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;

4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,,離心5min,,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;

3)經(jīng)1000rpm,,離心5min,丟棄上清,,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

4)待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。

10.jpg

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四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,,消化時間不宜過長,,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和技術(shù)部溝通,;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。

 


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