化工儀器網
詳細介紹
一,、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
大鼠胃黏膜成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1577 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內,；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品：
大鼠骨外膜細胞 | 人頜下腺囊腫細胞 |
組蛋白H3樣蛋白抗體 | 辣根過氧化物標記的C末端結合蛋白2抗體 |
人肝門靜脈成纖維細胞 | 辣根過氧化物標記的促黃體生成受體抗體 |
人結腸癌相關成纖維細胞 | 辣根過氧化物標記的同源三聚體鋅指蛋白ZHX3抗體 |
人腎小管上皮細胞 | 辣根過氧化物標記的卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體 |
人腎小球系膜細胞 | 辣根過氧化物標記的淋巴細胞抗原6G抗體 |
人腎小球內皮細胞 | 辣根過氧化物標記的FAM133B蛋白抗體 |
人腎足細胞 | 辣根過氧化物標記的維甲誘導蛋白6抗體 |
人輸尿管上皮細胞 | 辣根過氧化物標記的血管生成3/血管生成4抗體 |
人輸尿管平滑肌細胞 | 辣根過氧化物標記的7號染色體開放閱讀框63抗體 |
人膀胱上皮細胞 | 辣根過氧化物標記的緊密連接蛋白5抗體 |
人膀胱平滑肌細胞 | 大鼠胃黏膜成纖維細胞辣根過氧化物標記的骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 |
人膀胱成纖維細胞 | 辣根過氧化物標記的耳聾常染色體顯性遺傳相關蛋白1抗體 |
人前列腺上皮細胞 | 辣根過氧化物標記的A型病毒H7N9 M1蛋白抗體 |
人扁桃體間質細胞 | 辣根過氧化物標記的卵黃狀黃斑病蛋白3抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸的原因,，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
化工儀器網