詳細介紹
大鼠前列腺基底細胞
一,、細胞基本屬性
細胞名稱 | 大鼠前列腺基底細胞 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
商品貨號 | A01X1599 |
實驗步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細解剖鑷去除大腦白質,、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質,。
五,、大腦皮質放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,,放入50ml的離心管中,,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,,200-400U DNaseI),,混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六,、室溫1 000×g離心8min,,去上清液。
七,、沉淀中加入20%BSA重懸浮,,充分混勻,1 000×g,,20min,,4℃離心,去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,,100-300U DNaseI )重懸浮,,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,,700×g室溫離心6min,,去上清液。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,,4℃),,1000×g,4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,,6min,,室溫),,去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,,4ug/ml素 )重懸浮,,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,置于37℃,、5%CO2培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,,隨后隔天換液。
原代細胞分離培養(yǎng)的思路:
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出,,經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞,,再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠頜下腺上皮細胞 | 人牙周膜成纖維細胞 |
珠蛋白轉錄因子1抗體 | 辣根過氧化物標記的1號染色體開放閱讀框173抗體 |
人椎間盤纖維環(huán)細胞 | 辣根過氧化物標記的甲酰肽受體3抗體(脂氧A4受體) |
人毛囊干細胞 | 辣根過氧化物標記的E1A樣分化抑制因子3抗體 |
人踝或膝滑成纖維細胞 | 辣根過氧化物標記的細胞分化蛋白SEPT10抗體 |
人脂肪細胞 | 辣根過氧化物標記的髓磷酯髓鞘蛋白1抗體 |
人B淋巴細胞 | 辣根過氧化物標記的線粒體外膜孔蛋白3/電壓依賴陰離子通道蛋白3抗體 |
人T淋巴細胞 | 辣根過氧化物標記的19號染色體開放閱讀框24抗體 |
人Naive T cell 細胞 | 辣根過氧化物標記的TRM11蛋白抗體 |
人單核細胞 | 辣根過氧化物標記的磷化后期促進復合蛋白3抗體 |
人DC細胞 | 辣根過氧化物標記的磷化帕金森病蛋白2抗體 |
人NK細胞 | 大鼠前列腺基底細胞辣根過氧化物標記的5號染色體開放閱讀框49抗體 |
人內皮祖細胞 | 辣根過氧化物標記的上皮細胞粘附分子抗體 |
人淋巴管內皮細胞 | 辣根過氧化物標記的RAB6蛋白抗體 |
人骨髓肥大細胞 | 辣根過氧化物標記的細胞質PSD95相互作用因子抗體 |
注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,yi酶消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),,便于和技術部溝通,;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。