詳細(xì)介紹
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
大鼠嗅球神經(jīng)干細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1721 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三,、使用方法
客戶收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4)待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,,1000rpm,離心5min,,保留沉淀,;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),;消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,,離心5min,,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),;
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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兔胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的有絲分裂激A抗體 |
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豬前列腺成纖維細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的STOX1蛋白抗體 |
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,,消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決。