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詳細(xì)介紹
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1687 |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三,、使用方法
客戶(hù)收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴(lài)氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠氣管上皮細(xì)胞 | 兔腮腺細(xì)胞 |
凝溶膠蛋白重組兔單克隆抗體 | 膠體金標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 |
兔膀胱上皮細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的整合α4抗體 |
兔膀胱平滑肌細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的NFE2相關(guān)因子樣蛋白3抗體 |
兔膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的G蛋白偶聯(lián)受體83抗體 |
兔前列腺上皮細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的短鏈L-3羥烷基輔A脫氫抗體 |
兔前列腺成纖維細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體 |
兔腎周細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的Gasdermin D蛋白抗體 |
兔前列腺基底細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的宿主細(xì)胞因子2抗體 |
兔腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的TRIM38蛋白抗體 |
兔腎集合管上皮細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移8抗體 |
兔輸尿管成纖維細(xì)胞 | 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞膠體金標(biāo)記的LSM4蛋白抗體 |
兔腎周肌成纖維細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨激抗體 |
兔腎近端小管上皮細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體 |
兔甲狀旁腺細(xì)胞 | 膠體金標(biāo)記的整合樣金屬蛋白與凝血9型抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決。
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