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詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
兔腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2042 |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三,、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴(lài)氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人成骨細(xì)胞 | SK-MEL-24細(xì)胞 |
腎小球裂孔膜蛋白PDCN重組兔單克隆抗體 | Cy7標(biāo)記的生長(zhǎng)分化因子1抗體 |
RD-ES細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的剪切和多聚腺苷化特異性因子5抗體 |
REC-1細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的EXOC1蛋白抗體 |
RERF-LC-Ad1細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體 |
RERF-LC-Ad2細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的CD5L抗體 |
RERF-LC-AI細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的ENAH蛋白抗體 |
RERF-LC-MS細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的絲氨/蘇氨蛋白激Sgk3抗體 |
RKN細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的谷氨受體3A抗體 |
RKO-E6細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的Kelch樣蛋白15抗體 |
RL細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子SOX17抗體 |
RMG-I細(xì)胞 | 兔腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Cy7標(biāo)記的干擾-γ/IFN-γ抗體 |
RMUG-S細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的熱休克轉(zhuǎn)錄因子HSFY1抗體 |
RPMI6666細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的RNA結(jié)合蛋白23抗體 |
SKG-M細(xì)胞 | Cy7標(biāo)記的Ki67蛋白抗體 |
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決,。
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