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詳細介紹
組織來源：骨髓
種屬來源：兔
細胞簡介：兔骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多,，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞,，在骨髓細胞中約占0.04%，被認為是破骨細胞的前體細胞,，較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高,、全骨髓誘導法產生的破骨細胞數量多，純度高,，較脾細胞誘導法分化效率高,。骨髓單核細胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞，它屬干細胞類型,。目前,，大多數研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞,。
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：巨噬細胞樣
傳代特性：不增殖,；不傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
傳代比例：不傳代
一,、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
兔骨髓單核細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X2185 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
兔骨髓單核細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈巨噬細胞樣，在技術部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內,；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
公司正在出售的產品：
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翻譯延伸因子EF-1a重組兔單克隆抗體 | Cy5標記的FLJ40288蛋白抗體 |
Eca-109 (人食管癌細胞) (Hela污染細胞系) | Cy5標記的磷化Ephrin B抗體 |
ES-2 (人卵巢透明細胞癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的FAM58A蛋白抗體 |
FaDu (人咽鱗癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的真核翻譯起始因子2C4抗體 |
GBC-SD (人膽囊癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的2號染色體開放閱讀框18抗體 |
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H4 (人腦神經膠質瘤細胞) | Cy5標記的有機溶質載體蛋白1抗體 |
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HCC1937 (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的環(huán)氧合2/前列腺內過氧化物合成2單克隆抗體 |
HCC827 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的纖微絲相關糖蛋白2抗體 |
HCCC-9810 (人膽管細胞型肝癌細胞) (STR鑒定正確) | 兔骨髓單核細胞Cy5標記的藍色熒光蛋白的工程變體蛋白單克隆抗體 |
HCT 116 (人結腸癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的G蛋白結合蛋白RAB相互作用蛋白抗體 |
HCT-15 (人結直腸腺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的白細胞介10抗體 |
Hs 578T (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確) | Cy5標記的酪氨蛋白激受體A1抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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