人支氣管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞Neuro-2a（種屬鑒定）小鼠乳腺癌細(xì)胞帶熒光E0771+LUC（種屬鑒定）小鼠淋巴結(jié)上皮細(xì)胞SVEC4-（種屬鑒定）小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)染MC-38+OVA（種屬鑒定）人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞-永生化HCMEC猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞RF/6A（種屬鑒定）人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞U251 (STR鑒定正確)松ELISA試劑盒顆粒體蛋白(GRN)E

組織來源：支氣管組織

種屬來源：人

細(xì)胞簡介：人支氣管上皮細(xì)胞分離自支氣管組織,；支氣管(Bronchi)，是指由氣管分出的各級分枝,，由氣管分出的一級支氣管,，即左、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較,，前者較細(xì)長，走向傾斜,；后者較粗短,，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進入右主支氣管,。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是,。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成,、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子，從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng),。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘,、慢性阻塞性肺疾病、肺癌,、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機制中均起著重要的作用,。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性，因此,，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要,。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
一、細(xì)胞基本屬性

二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

人支氣管上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。