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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1579 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 腸組織 | 種屬來(lái)源 | 大鼠 |
詳細(xì)介紹
大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X1579 |
組織來(lái)源 | 腸組織 | 種屬來(lái)源 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
包被條件：PLL(0.1mg/ml),，明膠(0.1%)
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸道組織,；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段,，也是功能重要的一段,。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,，大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便,，再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,，以提供足夠的養(yǎng)分,，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細(xì)微的血管,，管徑平均為6-9μm,，連于動(dòng)、靜脈之間,，互相連接成網(wǎng)狀,。微血管壁薄,，管徑較小,，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換,。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,，在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織,。另外還常可見(jiàn)到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面，稱為周細(xì)胞,。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定,。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一,、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二,、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,，去除小腦和間腦,。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻,，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min,，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃),，1000×g，4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人B淋巴細(xì)胞 | 干擾α受體2抗體 |
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人單核細(xì)胞 | 磷化接頭蛋白Gab 1抗體 |
人DC細(xì)胞 | 磷化血清應(yīng)答因子抗體 |
人NK細(xì)胞 | 離子通道蛋白Kv3.1抗體 |
人內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞角蛋白3+12抗體 |
人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 | 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體 |
人淋巴管成纖維細(xì)胞 | 蛋白激Aγ抗體 |
人牙周膜成纖維細(xì)胞 | 線粒體核糖體蛋白L11抗體 |
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