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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X2189 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 腦動脈 | 種屬來源 | 兔 |
詳細介紹
兔腦微血管內(nèi)皮細胞
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 兔腦微血管內(nèi)皮細胞 | 商品貨號 | A01X2189 |
組織來源 | 腦動脈 | 種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞 |
培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞簡介：腦微血管內(nèi)皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,，能夠限制可溶性物質(zhì)和細胞等從血液進入大腦,。大腦微血管內(nèi)皮細胞與外周內(nèi)皮細胞相比具有一些相同特性。
腦微血管內(nèi)皮細胞存在許多細胞間緊密連接,，產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,，延遲細胞旁的通量；腦微血管的內(nèi)皮細胞間銜接得十分緊密,，不象其他組織的血管內(nèi)皮細胞那樣有較大的縫隙腦微血管內(nèi)皮細胞缺乏內(nèi)皮細胞的窗孔結(jié)構(gòu),，其液相物質(zhì)胞飲水平較低；腦微血管內(nèi)皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運系統(tǒng),，從而產(chǎn)生 “兩極分化"的表現(xiàn)型,。 與外周內(nèi)皮細胞相同，大腦微血管內(nèi)皮細胞表面表達細胞粘附分子,，調(diào)控白細胞進入大腦,。由于微血管內(nèi)皮細胞的器官特異性，內(nèi)皮細胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織,。
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min,，4℃離心，去上清,。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min,，4℃),，1000×g，4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠小腸Cajal間質(zhì)細胞 | 人小腸平滑肌細胞 |
血管緊張轉(zhuǎn)換2抗體 | PE-Cy3標記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體 |
人動脈外膜成纖維細胞 | PE-Cy3標記的D型天冬氨抗體 |
人肝動脈內(nèi)皮細胞 | PE-Cy3標記的NKAPL蛋白抗體 |
人肝動脈平滑肌細胞 | PE-Cy3標記的膀胱癌和乳腺癌過表達基因抗體 |
人腔靜脈平滑肌細胞 | PE-Cy3標記的PTCHD1蛋白抗體 |
人腔靜脈外膜成纖維細胞 | PE-Cy3標記的雙亮氨拉鏈激DLK抗體 |
人主動脈外膜成纖維細胞 | PE-Cy3標記的髓系/淋巴或混合型白血病11抗體 |
人食管上皮細胞 | PE-Cy3標記的肌醇六磷激1抗體 |
人食管平滑肌細胞 | PE-Cy3標記的精子細胞相關(guān)蛋白抗體 |
人食管成纖維細胞 | PE-Cy3標記的5-三磷肌醇受體3抗體 |
人胃黏膜上皮細胞 | 兔腦微血管內(nèi)皮細胞PE-Cy3標記的TRIO蛋白抗體 |
人胃平滑肌細胞 | PE-Cy3標記的L型鈣通道蛋白a1亞型6抗體 |
人胃成纖維細胞 | PE-Cy3標記的轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體 |
人肝成纖維細胞 | PE-Cy3標記的腫瘤p63調(diào)節(jié)樣蛋白抗體 |
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