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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X2115 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 陰莖 | 種屬來源 | 兔 |
詳細介紹
兔海綿體平滑肌細胞
培養(yǎng)基：原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞簡介：海綿體平滑肌細胞不僅含有豐富的腎上腺素能受體，而且還含有多種其他能受體,，作為勃起組織中主要的舒收縮成分,，是組成陰莖勃起功能的主要承擔著,。在病理條件下，陰莖勃起組織中海綿體平滑肌細胞減少與勃起功能障礙的發(fā)生關系密切,，且與臨床表現(xiàn)的嚴重程度一致,。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 兔海綿體平滑肌細胞 | 商品貨號 | A01X2115 |
組織來源 | 陰莖 | 種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 梭形細胞,，不規(guī)則細胞 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質。
五,、大腦皮質放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g，20min，4℃離心,，去上清,。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠胚肺成纖維細胞 | HELF (人胚肺成纖維細胞) |
重組程序性死亡配體1兔單克隆抗體 | 生物標記的細胞因子誘導凋亡抑制因子1 |
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HCCLM3 (人高轉移肝癌細胞) | 生物標記的鋅指蛋白197抗體 |
NCI-H661 (人大細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的CD20樣蛋白1抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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