化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X2026 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 心臟 | 種屬來源 | 兔 |
詳細介紹
兔冠狀動脈平滑肌細胞
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 兔冠狀動脈平滑肌細胞 | 商品貨號 | A01X2026 |
組織來源 | 心臟 | 種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 長梭形細胞,，不規(guī)則細胞 |
培養(yǎng)基：原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞簡介：冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部,，分左右兩支,，行于心臟表面。冠狀動脈疾病發(fā)生和發(fā)展的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型,。
近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,，并進一步造成血管疾病的原因 ,。因此，對冠狀動脈血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的冠狀血管疾病的靶向治療方法,。
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì),。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六,、室溫1 000×g離心8min，去上清液,。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻,，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人椎間盤纖維環(huán)細胞 | 16HBE (人支氣管上皮樣細胞) |
三聚氰胺單克隆抗體 | 生物標記的多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移1抗體 |
TE-1 (人食管癌細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的色氨羥化抗體 |
TF-1 (人血液白血病細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的視神變誘導蛋白抗體 |
THP-1 (人單核細胞白血病) (STR鑒定正確) | 生物標記的6號染色體開放閱讀框191抗體 |
TSCCa (人舌鱗癌細胞) | 生物標記的磷化神經(jīng)突觸1抗體 |
U-2 OS [U2OS] (人骨肉瘤細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的接頭蛋白DOK7抗體 |
U251 (人膠質(zhì)瘤細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的LRRC39蛋白抗體 |
U-87 MG (人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的血管生長因子VG5Q抗體 |
U-937 (人組織細胞淋巴瘤細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的MREG蛋白抗體 |
VCaP (人前列腺癌細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的22號染色體開放閱讀框29抗體 |
WI-38 (人胚肺細胞) (STR鑒定正確) | 兔冠狀動脈平滑肌細胞生物標記的FLJ40288蛋白抗體 |
WISH (人羊膜細胞) (Hela污染細胞系) | 生物標記的轉錄因子MYB相關蛋白B抗體 |
ZR-75-1 (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的細胞周期蛋白依賴性激抑制劑2C抗體 |
CAL 27 (人舌鱗癌細胞) (STR鑒定正確) | 生物標記的細胞角蛋白2e抗體 |
化工儀器網(wǎng)