人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化公司正在出售的產(chǎn)品：人胎盤(pán)絨毛癌細(xì)胞JAR(STR鑒定正確)人乳腺癌細(xì)胞BT-20(STR鑒定正確)人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞RD(STR鑒定正確)小鼠肺上皮細(xì)胞TC-1（種屬鑒定）綿羊肺成纖維細(xì)胞OAR-L1（種屬鑒定）人卵巢癌細(xì)胞SW626(STR鑒定正確)SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞hFOB1.19(STR鑒定正確)

細(xì)胞詳述

平滑肌即無(wú)紋肌的通稱,，平滑肌是由長(zhǎng)紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成,。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官，而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素（肌層）,。平滑肌細(xì)胞互相連接,，形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官；在功能上可以通過(guò)縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動(dòng)和變形,，也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮,，使器官對(duì)抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。

支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮,、舒張,、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過(guò)程有關(guān)，如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等,。例如在哮喘發(fā)病時(shí),，可以檢測(cè)到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大，表型也發(fā)生改變,，由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型,，并分泌多種與細(xì)胞因子；而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象,。

該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因,。

注意事項(xiàng)：  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,，不能用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,。

細(xì)胞特性

1)  細(xì)胞來(lái)源于人正常支氣管組織。

2) 細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4) 不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5） 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。

一,、細(xì)胞基本屬性

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決,。