詳細(xì)介紹
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
兔腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2108 |
組織來源:正常腎上腺組織
種屬來源:兔
細(xì)胞簡介:腎上腺髓質(zhì)位于腎上腺中心,。腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞分泌兩種激素:腎上腺素和去甲腎上腺su,。腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞較大,呈多邊形,,圍繞血竇排列成團(tuán)或不規(guī)則的索網(wǎng)狀,,細(xì)胞內(nèi)含有細(xì)小顆粒。
培養(yǎng)基:原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形,,不規(guī)則細(xì)胞
傳代特性:根據(jù)細(xì)胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
兔腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,,細(xì)胞形態(tài)呈梭形,,不規(guī)則細(xì)胞,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,,細(xì)胞可傳2-3代,;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,,請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,,1000rpm,,離心5min,保留沉淀,;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),;消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,,丟棄上清,,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),;
4)待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時(shí)間不宜過長,,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和技術(shù)部溝通,;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時(shí)和我們聯(lián)系,,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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