化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X2055 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 結(jié)腸 | 種屬來源 | 兔 |
詳細(xì)介紹
組織來源：結(jié)腸
種屬來源：兔
細(xì)胞簡(jiǎn)介：結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁,，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",，將小腸包圍在內(nèi)。
結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層,，固有層,，粘膜肌層），粘膜下層,，肌層，外膜,。結(jié)腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳等多種致癌因素作用下導(dǎo)致結(jié)腸癌,，是常見的惡性腫瘤之一。因此,，體外培養(yǎng)結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞為研究進(jìn)一步結(jié)腸癌等疾病提供了前提和基礎(chǔ),。
培養(yǎng)基：原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2055 |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈鋪路石狀細(xì)胞,，不規(guī)則細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 | SUM159PT (人乳腺癌細(xì)胞系) (STR鑒定正確) |
D型天冬氨抗體 | 生物標(biāo)記的胎盤葉受體蛋白2抗體 |
KGN (人卵巢顆粒細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的白細(xì)胞介6受體α/IL-6Rα抗體 |
NCI-H2347 (人肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的21號(hào)染色體開放閱讀框66抗體 |
SNU-182 (人肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的結(jié)腸癌抗原10抗體 |
HPAF-II (人胰腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的G蛋白γ5/Gγ5 抗體 |
SNU-387 (人肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的溶質(zhì)載體家族25成員17抗體 |
8305C (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體 |
MM.1S (人IgA- 骨髓瘤細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的G蛋白激活內(nèi)向鉀通道3抗體 |
Daoy (人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 |
BHT101 (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體 |
CAL-62 (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確) | 兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞生物標(biāo)記的絲裂原活化蛋白激激1抗體 |
HMC (人腎小球系膜細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的核苷焦磷2抗體 |
HMC3 (人小膠質(zhì)細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 |
NCI-H647 (人肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的真核翻譯起始因子2C1抗體 |
四,、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
化工儀器網(wǎng)