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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1182 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 人膽囊組織 | 種屬來源 | 人 |
詳細介紹
一,、細胞基本屬性
細胞名稱 | 人膽囊上皮細胞永生化 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 1×106 |
商品貨號 | A01X1182 |
細胞詳述
膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造,，有濃縮和儲存膽汁之作用,。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成,。
膽囊內(nèi)面以粘膜覆蓋,，有發(fā)達的皺襞。膽囊收縮排空時,，皺襞高大而分支,；膽囊充盈時，皺襞減少變矮,。粘膜上皮為單層柱狀,，內(nèi)分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征,，具有較強的吸收和濃縮功能,，上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽，經(jīng)細胞側(cè)面的質(zhì)膜轉(zhuǎn)運至上皮細胞間隙內(nèi),，吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內(nèi),。同時，膽囊粘膜亦有分泌功能,，分泌粘液,。
該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
注意事項： 收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代,，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,，不能用來培養(yǎng)細胞。
細胞特性
1) 細胞來源于人膽囊組織,。
2) 細胞鑒定：細胞角蛋白19（CK-19）免疫熒光染色為陽性,。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：上皮樣,，多角形細胞,，貼壁培養(yǎng),。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四,、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì)。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g，20min,，4℃離心,，去上清。
八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮,，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞,，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔成骨細胞 | OVCAR-8人卵巢癌腺癌細胞專用培養(yǎng)基 |
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NCM 460人正常結(jié)腸上皮細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的多巴胺受體D3抗體 |
NCM 460人正常結(jié)腸上皮細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的真核翻譯起始因子2C4抗體 |
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NK-92人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的EHD4蛋白抗體 |
NK-92 MI人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的核因子κB抑制蛋白β抗體 |
NK-92 MI人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的G蛋白偶聯(lián)受體137抗體 |
NOZ人膽囊癌細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的E3泛蛋白連接HECW2抗體 |
NOZ人膽囊癌細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的富含亮氨重復(fù)神經(jīng)元5抗體 |
NPC/HK-1人鼻咽癌細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的p53結(jié)合蛋白1抗體 |
NPC/HK-1人鼻咽癌細胞專用培養(yǎng)基 | 人膽囊上皮細胞永生化PE-Cy7標記的鋅指蛋白516抗體 |
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Nthy-ori 3-1人甲狀腺正常細胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標記的肌球蛋白5C抗體 |
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