化工儀器網(wǎng)
資料下載
轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒說明書
閱讀：157 發(fā)布時間：2023-2-21| 提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 50KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 68次 | |
| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 157次 |
| 免費下載 | 點擊下載 |
轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒說明書
1,、試劑盒簡介貨為了適應(yīng)TLR2受體染料法熒光定量PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,，本公司參照 OIE 國際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列,，經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化,，開發(fā)了本試劑盒,。應(yīng)用本試劑盒進(jìn)行檢測具有快速,、靈敏,、特異、準(zhǔn)確,、安全操作簡單,、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。
2,、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,，具體組成參見表 1：s
表 1：試劑盒組成（50test/盒）
試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物su標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物su標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,，特異性均達(dá)到*。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,，重現(xiàn)性為*,。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,，可實現(xiàn)對其的直接檢測,，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣,，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時,。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富,，除TIANDZ公布的序列外,，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,，憑借公司擁有的豐富的菌種資源,，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果,。
樣本處理及要求：
1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。
樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
標(biāo)記物：血清 血漿 組織勻漿等
應(yīng)用：僅用科研實驗檢測定量,，定性檢
檢測方法：夾心法
技術(shù)要求：全程按說明書步驟檢測,，操作規(guī)范，專業(yè),，儀器設(shè)備齊全,。
規(guī)格：48t/96t
性狀：液體
運輸方式：快遞發(fā)貨
有效期：6個月品
特點：靈敏性高，---性,，吸附均勻,，吸附性好，回收利用率高,，是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品,。
使用范圍：此產(chǎn)品供科研實驗使用，不得用于---,。
用途：用于測定人血清,、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性,。
注意事項:
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用,。
9.不能使用過期產(chǎn)品,。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn),。
每個樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2,。
表 2 每個樣品測試反應(yīng)體系配制表
注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員,。