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Pim-2原癌基因(PIM2)檢測(cè)試劑盒本試劑盒用于測(cè)定人血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中 25 羥基維生素 D3（25(OH)D3）含

量,。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中Pim-2原癌基因(PIM2)水平,。用純化的Pim-2原癌基因(PIM2)抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加Pim-2原癌基因(PIM2),，再與 HRP 標(biāo)記的 Pim-2原癌基因(PIM2)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色,。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的Pim-2原癌基因(PIM2)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中Pim-2原癌基因(PIM2)濃度,。

Pim-2原癌基因(PIM2)檢測(cè)試劑盒抗原修復(fù)方法 

常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01M pH6.0）,、EDTA 抗原修復(fù)液（pH8.0 或

9.0）等等。 

一,、酶消化修復(fù)法 

切片脫蠟水化處理,，TBS 沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,，37℃孵育

20~30min 后 TBS 沖洗即可,。 

二、微波抗原修復(fù)法 

微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料

切片架上,，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或高檔繼續(xù)微波 10~15min,，取出微波

盒冷卻至室溫后,，自來(lái)水沖洗，取出切片,。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,，

須自行調(diào)整。 

三,、直接高壓抗原修復(fù)法 

取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,，將組織切片置于耐高溫切片架上,，修復(fù)

液沸騰后放入切片架,，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí) 1.5~2.5min 即可脫離熱源,，自

然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,，取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。

四,、隔水式高壓抗原修復(fù)法 

不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰,，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸

騰，將切片放入微波盒中,，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,，待噴氣后計(jì)時(shí)

4~8 min 即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,，取出切片,。此方法適用

于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。